Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型肾病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次显现用到肾脏自身抗形体到显现用到1改进型癌症诊疗症状的成果所部在婴幼儿时期就有不太好的叙述，多个肾脏自身抗形体非典改进型的婴幼儿里有70%在毒素转换后10年内患上癌症，而随访15年的婴幼儿这一使用量降低到84%。相比较之下，占总诊疗1改进型癌症一半以上的改进型1改进型癌症的发病有助于还未取得更好的学术研究。

越来越多的人开始运用于分期种系统来假定1改进型癌症的成果：生物形体在显现用到多种肾脏自身抗形体时转回第1阶段，显现用到血糖异常时转回第2阶段，显现用到症状时转回第3阶段。一些多发肾脏自身抗形体非典改进型的生物形体，在1期和2期，成果较快，并其发展为发病的1改进型癌症。我们之前叙述了一四组在首次扫描到多种肾脏自身抗形体抽样后数10年无癌症的极快成果者，这四组病征总数少，但特征相当明确。随后，我们推断显现出肾脏自身免疫免疫CD8+T肝细胞中间形体在成果极快的病征里基本不存在，但在近期发病和长期存在的癌症病征里很容易扫描到。这可能说明了，与成果病征相比较，这些病征免疫性中间形体的适度增强。

晚期学术研究说明了，尽管适度性T肝细胞(Treg)使用量正常人，但癌症病征存在一些种系统不足之处，其里仅限于对IL-2的中间形体能力降低。此外，癌症病征里的现像CD4+T肝细胞可能对适度更具抵抗性，表现为现像T肝细胞的诱发消退，自然产生的Treg和形体外产生的诱导Treg，以及免疫经历的CD4+T肝细胞里IL-2中间形体消退。本学术研究的借以是叙述了CD4+适度性T肝细胞(Treg)在一小群极极快成果者里的特征，他们的中年人为43岁(31-72岁)，随访一段时间为18-32年。

方法有：BOX学术研究是一项以人群为基础的横向学术研究，在21岁此表确诊的病征亲属里检查1改进型癌症的危险因素。我们之前叙述了长期极快成果者的特征，他们保持稳定多重肾脏自身抗形体非典改进型最多10年，但未显现用到癌症的诊疗症状，快性或非完成性免疫性。随后，10名此后保持稳定无癌症并希望给予大量血液抽样的极快成果者设为T和B肝细胞种系统分析。在在此之前的学术研究里，8名快成果者(SP四组)，里位年岁43岁(31-72岁)，18 - 32岁之间的肾脏自身抗形体非典改进型。所有的自发性都始终保持1改进型癌症成果的1期，尽管一些人随后丧失了肾脏自身抗形体对某些免疫的非典改进型中间形体，然而，一名病征早就始终保持2期数6年，但未显现用到诊疗症状，一名病征被诊断为癌症，该受试者72岁，在收集实验抽样时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据分析里对该NAD完成了单独审计。复合外周血单个质子肝细胞(PBMCs)，选用多参数流式肝细胞忍术和T肝细胞诱发试验审计NAD里Treg的振幅、表改进型和种系统。运用于FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、表征和复出)完成无指派聚类分析，审计Treg表改进型。

结果：与生活品质NAD相比较，来自快成果形体的遗忘CD4+T肝细胞的指派聚类揭示，启动时着的遗忘CD4+ Treg振幅降低，与持续性诱导的TNFR相关细胞内(GITR)暗示降低有关。一名HbA1c升高的病征与成果极快者和反之亦然的对照四组相比较，Treg谱并不相同。种系统分析说明了，与生活品质NAD相比较，来自极快成果形体的Treg介导的CD4+现像T肝细胞诱发相对来说受损。表现为对现像CD4+T肝细胞CD25和CD134暗示的诱发降低。

布1 深入的表改进型分析揭示，CD4+Treg亚改进型在快成果队列里降低。由FlowSOM转换成的Treg室，聚集在来自所有NAD的活着CD4+CD45RA -肝细胞上。根据标识物暗示鉴定显现出10个元簇:遗忘T肝细胞_1;遗忘T cell_2;遗忘T cell_3;遗忘T cell_4;CD49b遗忘T肝细胞;HLA-DR + GITR +遗忘T肝细胞;存储器Treg_1;存储器Treg_2;存储器Treg_3;和存储器Treg_4。(a)运用于9个不同Treg标识转换成的10个元簇的MST。每个数据流值得一提的是一个空降兵(100个空降兵)，更大的元空降兵(10个元空降兵)在数据流四组周围上色。每个数据流里的年糕布坚称单个标识的暗示级别。(b)每个元聚类的热布，以揭示整形体而言标识暗示。(c, d)为HD四组(c)和SP四组(d)转换成布，以及FlowSOM识别的每个元簇的孔洞。(e-l)相比之下轻元素为每个metacluster箱该线布(轻元素> 0.05%)确定为HD和SP四组:存储器Treg_2 (e),存储器Treg_3 (f),存储器Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +遗忘T肝细胞(h)、遗忘T cell_1(i),遗忘T cell_2 (j),遗忘T cell_3 (k) n d CD49b遗忘T肝细胞(l)。蓝色边框值得一提的是这些年来SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对表示法秩检验。此键适用于布形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

布2 运用于CITRUS的预测模改进型证实，Treg振幅的降低是成果极快的标志。分级依赖改进型(a - f)和大豆分析(g-k)比较SP自发性和反之亦然的HD自发性在CD4+CD45RA−T肝细胞上的关联。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l社会性的值得一提的是性布。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3可溶性，然后通过HLA-DR和GITR暗示完成复合，虚拟FlowSOM社会性。(b) HD(网纹)和SP(斑点)四组以及NADSP 606(蓝色)里CD25+ cd127的振幅质子心内容布。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+依赖改进型子集的箱该线布;(c) HLA-DRloGITR−(存储器Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(存储器Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(存储器Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+存储器T cell)。(g - i)龙眼簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3暗示强度着色，边框突显现出的簇被识别为SP和HD队列之间的不同。(j)箱该线布揭示了在SP(斑点)和HD(灰点)四组里，CITRUS遗忘Treg_3和Treg_4的相比之下轻元素(使用量)。(k)直方布揭示每个簇的表改进型(粉红色)和Treg标识相比之下暗示与背景暗示(黄色);上列，存储器Treg_3;示意图四人，存储器Treg_4。背景与所有其他簇里标识的暗示有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对表示法秩检验

布3 与生活品质献血者相比较，成果极快者遗忘treg的GITR降低。每个遗忘CD4+T肝细胞元簇(遗忘T肝细胞_1;遗忘T cell_2;遗忘T cell_3;CD49b +遗忘T肝细胞;HLA-DR + GITR +遗忘T肝细胞;存储器Treg_2;存储器Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)扫描每个暗示标识的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)队列的暗示热布(sp606不仅限于在内)。(c,d)遗忘Treg_4元簇里所有HD(灰色)、所有SP(黄色)和SP 606(蓝色)的FlowSOM GITR暗示串联，揭示直方布(c)和质子心内容布(d)。Wilcoxon配对表示法秩和检验，p< 0.07(蓝色)所有NAD仅限于，p< 0.05(黄色)NADSP 606和反之亦然的HD不仅限于在测试里。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs里GITR暗示，从分级依赖改进型，从所有HD(灰色)、所有SP(黄色)和SP 606(蓝色)串联，揭示直方布(e)和质子心内容布(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对表示法秩检验

布4 来自极快成果的CD4+ treg肝细胞控制现像CD4+T肝细胞的能力降低。SP四组用黄色的该线和边框坚称，HD四组用银色的该线和边框坚称，蓝色的该线/边框坚称NADsp606。运用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T肝细胞完成分选。CD4+CD25−(应答者)被标识为CFSE, Treg按观察的使用量滴定。用抗CD3 /28微珠活着化肝细胞，人才3翌日完成流式肝细胞忍术扫描。(a-d)与CD4+应答者相比之下应的treg人才(免疫)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD应答者人才。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE诱发总和(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的诱发总和。运用于非典改进型对照(启动时着的拥护肝细胞则有treg)近似值诱发总和。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

布5 现像CD4+T肝细胞对极快成果的T肝细胞活着化的诱发更敏感。SP四组用黄色的该线和边框坚称，HD四组用银色的该线和边框坚称，蓝色的该线/边框坚称NADsp606。运用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T肝细胞完成分选。CD4+CD25−(应答者)被cfsel标识，treg按观察的使用量滴定。用抗CD3 /28微珠活着化肝细胞，人才3翌日完成流式肝细胞忍术(CD25反染)和肝细胞因子分析。HD Treg与HD、SP或sp606应答者协同人才。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE诱发百分所部(b)。(c,d) CD25诱发百分所部(c)和CD134诱发百分所部(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共人才里的暗示。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

结论：我们得显现出的结论是，来自极快成果子的活着化遗忘CD4+Treg在GITR暗示里取得了扩展和珍贵，强调了大幅度学术研究Treg在1改进型癌症风险生物形体里的异质性的必要性。

原文显现来历：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28